《细胞生物学实验》课程教学大纲
适用专业：生物制药、海洋药学、生物技术、生科基地
实验课总学时数：34
实验课学分数: 1
课程性质：必修
应开实验项目： 6 个
应开实验时间：药学(生命科学与技术基地班)，海洋药学-第3学期；生物技术-第4学期；生物制药-第5学期。
实验类别：专业基础
一、实验教学目标与基本要求
教学目标：
细胞生物学实验课程的教学目标是培养学生熟悉细胞生物学基本原理、熟练掌握专业实验操作技能，为学生进一步科学研究提供一个良好的实验基础。本课程主要涉及细胞生物学专业基本技术，包括细胞标本的制备与细胞器的观察，细胞的消化、传代和计数，细胞膜的融合和渗透性，基因组DNA提取，DNA染色和细胞有丝分裂相的观察，考马斯亮蓝法显示细胞骨架。从细胞形态学，细胞组分观察和生命活动三个部分，为学生搭建了一个相对完整的细胞生物学实验学校平台。学生需要掌握书写实验记录及实验报告的能力，并通过在课堂上积极参与及课外独立学习增强细胞生物学相关专业知识。
本课程在传授细胞生物学实验操作的同时，穿插细胞生物学研究过程的科研故事进行思政教育，帮助学生认识理解科研的本质，树立诚信踏实的科研品质，培养良好的科研习惯，加深学生对科技强国的认识，激发学生的热爱国家，为国奉献的情怀。
技能要求：
1.培养学生熟悉并掌握细胞生物学基本实验技能
2.提高学生分析问题和解决问题的能力
考核方式：
本实验课程总评成绩以过程性考核为准，无期末试卷考试。
二、实验教材（讲义）及虚拟仿真资源
教材（讲义）：
细胞生物学实验教程(双语版) 言惠文 主编，人民卫生出版社，2018 ISBN：978-7-117-25475-5
虚拟仿真资源： 无
三、实验课程内容与学时分配
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序号 |
实验项目名称 |
实验类型 |
项目 学时数 |
分组 人数 |
实验项目 内容及要求 |
指导重难点分析 |
备注 |
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1 |
细胞标本的制备与细胞器的观察 |
综合性 |
6 |
2 |
1. 通过实验掌握光学显微镜的原理及使用方法； 2. 学会如何制作临时细胞装片； 3. 认识人体口腔上皮细胞的结构; 4. 掌握詹纳斯绿染色法显示细胞中的线粒体的方法。 |
1. 细胞标本涂抹不匀导致未形成单层细胞图层； 2. 显微镜观察时，显微镜视野可以调暗一些，利于使细胞之间的界限明显便于观察。 |
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2 |
细胞的消化、传代和计数 |
综合性 |
6 |
2 |
1. 掌握细胞传代培养的方法； 2. 建立严格的无菌操作观念； 3. 观察细胞的形态特征及生长状况； 4. 学习血球计数板的构造及细胞计数原理； 5. 掌握细胞计数的操作方法。 |
1. 注意无菌操作并防止细胞之间的交叉感染； 2. 避免重复计数和漏记，在计数时，对沉降在格线上的细胞的统计应有统一的规定。 |
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3 |
细胞膜的融合和渗透性 |
综合性 |
5 |
2 |
1. 观察溶血现象 2. 了解细胞膜的渗透性 3. 观察细胞融合现象 4. 了解PEG诱导体外细胞融合的基本原理 5. 掌握细胞融合的基本方法 |
1. 轻柔操作，避免人为因素造成的红细胞破裂； 2. PEG与血细胞接触时间长短对于融合率的影响。 |
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4 |
基因组DNA提取 |
综合性 |
6 |
2 |
1. 掌握基因组DNA抽提的方法； 2. 理解分离纯化的基本原理； 3. 掌握核酸电泳的方法 |
1. 防止核酸酶对DNA的降解； 2. 针对不同实验材料要选择不同的裂解预处理方法； 3. 抽提时动作要轻柔 |
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5 |
DNA染色和细胞有丝分裂相的观察 |
综合性 |
5 |
2 |
1. 了解Feulgen反应的基本原理。 2. 掌握细胞分裂各期的主要特点。 |
1. 水解是本实验成败的关键之一。重要的是温度，如果温度过高或时间过长，造成水解过度； 2. 分辨细胞分裂的各个不同时期。
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6 |
考马斯亮蓝法显示细胞骨架 |
综合性 |
6 |
2 |
1. 掌握考马斯亮蓝R250对植物细胞骨架染色的方法； 2. 通过对洋葱内皮细胞的处理，掌握植物细胞骨架的制备方法与显微形态观察。 |
1. 使用TritonX-100的缓冲液处理材料的原因； 2. 3%戊二醛溶液对细胞骨架和细胞形态的维持十分重要，固定时间应不低 |
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四、责任教师及课程组主要成员
课程负责人：
课程教学组主要成员：孙燕、钱民先、王中原、周君、刘晓敏、朱娟娟、崔淑方、吴彦萍、魏祎、孙玲玲