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一、 校对仪器工作状态
1. 选定检测波长: 从有机玻璃盒中取出干涉滤光片(250nm或280nm),插入仪器正面“滤光片”下方小长方孔内,并使其插入到底部位置(插入时应注意使干涉滤光片侧面有一直径为3mm的半球形凹槽朝上)。
2.按下“电源开关”(在仪器后背板上),仪器预热20分钟,以便得到较好的稳定性。
3. 校对T﹪~A
a). 按下按键开关“T”键,“透过率T”指示灯亮。调节“调T”旋钮(顺时针调节透过率增大),使数字显示100,此时透过率T为100% 。
b). 按下按键开关“1A”键,“吸光度A”指示灯亮,调节“A调零”旋钮,使数字显示000,此时吸光度A为零。
二、 直接与电脑连接检测、绘制、打印、保存样品分离图谱及计算有关数据。
1. 将仪器后背板“接电脑”插口与电脑COM1串行口用随机配置的连接线相接。
2. 将吸光度量程2A~0.05A置任意档(勿置于T档)。
3. 层析系统准备就绪后开启电脑,双击“collection”进入控制软件,按如下进程操作:检测操作 / 采集COM1 / 保存(默认文件名为当前日期)/ 洗脱谱图选择 / 吸光度(默认状态为1A) / 记录速度(默认状态为10个小时)。
4. 用键盘“Home(放大)”和“End(缩小)”键调节洗脱谱图在电脑屏幕上的大小。
5. 确定基线: 调节“调T”旋钮,确定基线位置。为防止系统出现负漂移,基线通常调节在大于零的位置上,如满量程的十分之一。读取A值时注意扣除此数值。
6. 确定好基线位置后,即可上样(特别注意上样后切勿再改变基线位置)。当洗脱样品流过检测仪时,电脑即可绘制出样品吸光度A随时间h变化的图谱。
7. 实验结束: 点击检测操作 / 停止COM1采集 / 确定。
8. 工具栏功能说明:
a) 单击工具栏中“ ”按钮,所绘谱图全貌不论时间长短将全部显示在屏幕上。
b) 单击工具栏中“ ”“ ”按钮一次,屏幕显示谱图横坐标相应展宽或压缩十分之一。
c) 单击工具栏中“ ”“ ”“ ”“ ”按钮,所绘谱图可相应向左移动十分之一帧,向左移动一帧,向右移动十分之一帧,向右移动一帧。
d) 点击工具栏 “ ”按钮,按住鼠标左键,用方框选取需要计算面积的谱图,松开左键可显示该谱图的面积。该面积是在坐标系统默认状态下(吸光度为1A,记录速度为10小时)计算出来的一个无量纲的量。坐标系统改变(即峰形大小改变),其数值不变。此项功能对同一类型样品提取的得率情况进行比较尤为方便。
e) 单击工具栏 按钮,可计算所选收集峰的相关数据。方法如下:
用纵向两根棕色线确定收集范围:
点击左边一根棕色线,移至收集起始点,点击;
点 击右边一根棕色线,移至收集结束点,点击。
用纵向两根绿色线确定收集峰峰宽:
点击左边一根绿色线,移至收集峰的起始点,点击;
点击右边一根绿色线,移至收集峰的结束点,点击。
用横坐标上一根紫色线确定收集峰的基线:
点击紫色线,移至收集峰基线,点击。
完成上述选择后,界面右上方将显示收集峰的相关数据。
9. 双击谱图上任意一点,可显示该点A值或T% 值。
10. 在菜单“设置”中,可选择实验日期是否打印。
11. 在菜单“窗口”中,可选择二个层析谱图的排列方式。
三、 注意事项:
1. 对电脑硬件的基本要求
a).电脑在简体中文 WinXP下运行。
b).显示器分辨率为800*600或1024*768,小字体,256色配置。
c).电脑系统必须正常工作,保证COM1串行口有效。
2. 在电脑断电情况下连接系统接线。
3. 上述“点击”,均指单击鼠标左键。
4. 实验过程中需要切换或选择适当的洗脱谱图和吸光度,应在电脑菜单中直接操作(不可改变仪器工作状态)。
5. 加样前校对仪器工作状态,并确定好基线位置,加样后不可再调节仪器所有旋钮。
6. 实验结束后在样品池进口(下端为进口、上端为出口)串入恒流泵,用蒸馏水清洗10分钟以上,以免样品粘在样品池上而影响仪器检测灵敏度。
7. 实验结束后取出干涉滤光片置于有机玻璃盒中,并保持盒中干燥,切勿接触有害气体。禁止用水或有机溶剂擦拭滤光片表面。
8. 仪器应避免在强光下工作。
9. 在仪器通电情况下不得取出样品池,以免仪器内光电器件受损。
10. 环境温度过低,仪器背后“光源”灯不亮时,按光源“辅助起动”即可。
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